奶牛隐孢子虫PCR-RFLP及种系发育分析

摘要

应用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法对从浙江杭州整体搬迁至郑州1个月的某奶牛场隐孢子虫的感染情况进行了调查，并利用巢式PCR方法成功扩增出12个隐孢子虫分离株的18SrDNA，经SsP I和Vsp I酶切后进行分析。结果：共检查了624份粪样，共查出阳性样品14份，隐孢子虫总阳性率为2.24％(14／624)。发现两种形态不同的卵囊，根据其形态结构等特征初步鉴定为安氏隐孢子虫(Cryptospoddium.andersoni)和牛隐孢子虫(.C bovis)，其中安氏隐孢子虫的感染率为2.08，牛隐孢子虫的感染率为0.16。青年牛和成年牛的感染率高于犊牛。酶切图谱显示牛源隐孢子虫与骆驼源C.andersoni图谱相同;系统发育分析结果显示，12个奶牛分离株和C.andersoni处于同一分类单位。证实了本次分离的牛源隐孢子为C.andersoni.