乙型肝炎肝纤维化组织差异蛋白的筛选及DDAH1的功能研究

摘要

目的：对比分析乙型肝炎肝纤维化组织和正常肝组织的蛋白质组表达谱的差异，并初步探讨二甲基精氨酸二甲基氨基水解酶1(DDAH1)在肝纤维化发生发展中的功能。方法：利用双向凝胶电泳(2-DE)分离肝纤维化组织和正常肝组织总蛋白质后，经图像分析筛选差异表达的蛋白点，应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定差异蛋白质，并用Western-blot方法对DDAH1的表达水平进行验证。进一步测定肝组织中DDAH的活性、不对称二甲基精氨酸(ADMA)的含量，一氧化氮合酶(NOS)活性及NO2/NO3浓度。结果：鉴定出DDAH1等25个2倍以上的差异蛋白质。DDAH1的Western blot结果显示表达下降，与2-DE的结果一致。肝纤维化组织中DDAH的活性明显降低，其代谢底物ADMA含量增加，NOS活性下降，一氧化氮(NO)含量减少。结论：乙型肝炎肝纤维化组织与正常人肝组织的蛋白质表达谱有一定差异。其中，DDAH1有可能通过调节ADMA的代谢，影响NO合成参与了肝纤维化的发生发展。