骨髓细胞低温保存20年后细胞活力探讨

摘要

目的：用不同保护剂、降温方法降温，并液氮中保存入骨髓细胞，观察20年后细胞相关存活指标，揭示细胞长期保存的规律。rn 方法：人骨髓细胞以DMSO-AuP(10％二甲基亚砜-10％自体血浆)或DMSO—HES-HuA(5％DMSO-6％羟乙基淀粉.4％人血白蛋白)为保护剂，采用自控程序降温仪或超低温冰箱降温的低速降温，液氮液相中保存20年后，40℃复温，检测细胞相关存活指标。rn 结果：骨髓细胞保存20年后干细胞回收率良好，体现在粒单系造祖血细胞(CFu-GM)、长期培养起始细胞(LTC-IC)回收率大于40％，间充质干细胞(MSCs)维持着原有生长特性。保护剂DMSO-HES-HuA优于DMSO-AuP，体现在标本复温后成熟红细胞破坏少、形态完整、渗透性脆性不变，血小板、CFU-GM、LTC—IC回收率高，MSCs生长与扩增好。降温手段用自控程序降温仪降温或超低温冰箱降温均可。rn 结论：DMSO-HES—HuA保护剂的超低温冰箱降温液氮中保存是骨髓干细胞长期保存的方便、可靠方法。