食管鳞癌MicroRNA表达谱研究

摘要

目的:探讨食管鳞癌及癌旁正常组织的MicroRNA分子表达谱的差异,为进一步研究相关MicroRNA在食管鳞癌发生、发展中的分子机制奠定基础。rn 方法:选取3例新鲜的食管鳞癌组织及其癌旁黏膜为样品,应用TRIzol提出总RNA并进行质量检测。采用miRCURYTM ArrayPowe r标记试剂盒,用标记酶将 Hy3TM 荧光基团标记miRNA可以得到用于与芯片杂交的荧光探针。在标准条件下使用PhalanxTM 的热收缩杂交袋将标记好的探针和miRCURYTM(v.11.0)芯片杂交。使用Axon GenePix4000B芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度,使用GenePix pro v6.0 生物芯片扫描分析仪进行数据分析及统计处理。挑选部分表达差异的MicroRNA,应用实时定量PCR进行验证。rn 结果:得到了食管鳞癌及癌旁正常组织的MicroRNA表达谱,分析得到具有表达变化且具有统计学意义(单侧t检验,P＜0.05)的MicroRNA 13个,其中上调2个,下调11个。挑选表达上调的MicroRNA126和表达下调的MicroRNA518b进行实时定量PCR,得到和芯片一致的结果。rn 结论:食管鳞癌组织和癌旁正常组织存在差异表达的MicroRNA分子,可能与食管鳞癌的发生、发展相关,MicroRNA表达谱有望成为食管鳞癌分子检测的重要指标。