酶联免疫吸附试验影响因素及质控方法研究

摘要

目的: 探讨酶联免疫吸附(ELISA)试验中普遍存在的操作不规范问题采用质控方法提高其结果的准确性和可行性。rn 方法: 94份HBcAb阴性血清标本，采用2种不同加样顺序对竞争抑制法进行对比实验，观察其差异；以癌胚抗原(CEA)检测为例，对酶联免疫检测实验操作的关键步骤进行质控，回顾性将我室15个不同批次的CEA标准血清结果总结分析，计算批间变异系数；选取范围在5.0-5.5 ng/mlCEA临界值混合血清，检测45个批次的平均值、标准差和变异系数。rn 结果: 用2种不同顺序加样方法检测HBcAb的结果显示，2种方法差异非常显著，P<0.001。交替加样法未见假阳性结果，而顺序加样法有17.02％(16/94)出现。对15个不同批次CEA标准血清分为0、2、5、15、50、75ng/ml，所做的标准曲线统计处理，其620吸光度变异系数分别为11.8％、11.8％、9.22％、8.78％、8.46％和4.23％.该变异反应出本室常规条件下的变异，操作者常规操作水平。CEA临界值血清经过45次不同批次实验，平均值±标准差为0.3633±0.0134，其变异系数3.68％。rn 结论: 对酶联免疫实验中采用竞争抑制法的项目应采用交替加样法以便减少假阳性；对ELISA实验操作中的几个关键步骤进行质控，能够保证实验的准确性。