一种茶叶游离氨基酸定量新方法——DNFB衍生化法

摘要

氨基酸的α-氨基能与2,4-二硝基氟苯(DNFB)发生衍生化反应,本试验通过乙酸乙酯萃取反应体系中的氨基酸衍生物(DNP-AA),并测定其在420nm的吸光值,建立了一套茶叶游离氨基酸定量新方法。该法对不同茶类分析结果与茚三酮显色法基本一致,但具有更高的灵敏度和稳定性。DNP-AA的吸光值(Y)和氨基酸浓度(X)的回归方程分别为L-茶氨酸:Y=0.9920X+0.0036 (r2=0.9998)和L-谷氨酸:Y=0.9403X-0.0008(r2=0.9995),线性范围为0.02～1.00mg/mL。衍生化反应体系:1.0mL茶样浸提液,1.0mL 0.2mol/L NaHCO3,1.0mL 1％(V/V)DNFB-二氧六环溶液,充分混匀后,于60℃水浴加热,暗处密闭反应40min,加入0.5mL 1mol/LHCl终止反应.在该反应条件下,红茶、绿茶、乌龙茶、黄茶、白茶和黑茶的平均加标回收率和相对标准偏差(RSD)分别为99.194％～101.250％和0.507％～1.299％(L-茶氨酸)、98.947％～101.840％和0.500％～1.271％(L-谷氨酸)。