siRNA沉默钙网蛋白基因抑制人肝癌细胞的增殖及侵袭能力

摘要

目的：探讨钙网蛋白(calreticulin CRT)对人肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2增殖及侵袭能力的影响.rn 方法：利用siRNA沉默肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2 CRT的表达.通过免疫荧光技术及Wertern blot方法检测CRT siRNA转染效果,Cell counting kit-8(CCK-8)检测细胞的增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡能力变化;运用Transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力;Wertern blot方法检测p-Akt、Akt蛋白表达.rn 结果：siRNA实验组SMMC-7721、HepG2细胞24、36、48h相对生长抑制率分别为(41.0±2.2)％、(46.5±1.6)％、(59.7±2.2)％;(36.8±2.7)％,(47.3±1.8)％、(61.5±3.2)％,与空白组及阴性对照组比较,siRNA实验组增殖能力明显降低(p＜0.05).沉默CRT36h后SMMC-7721、HepG2细胞的凋亡率分别(45.2±9.1)％、(48.9±8.0)％,与空白组及阴性对照组比较较,siRNA实验组凋亡能力上调(p＜0.05).Transwell实验证实:沉默CRT36h后SMMC-7721、HepG2细胞穿膜个数空白组、阴性对照组、siRNA实验组分别为:(96.8±7.3)、(95.6±5.4)、(34.0±4.2);(124.0±9.9)、(121.6±7.0)、(70.4±9.5),与空白组及阴性对照组比较,实验组侵袭能力降低(p＜0.05).沉默CRT 36h后,与空白组及阴性对照组比较,p-Akt蛋白表达水平均下调,(p＜0.05).rn 结论：沉默肝癌细胞CRT后,对细胞的增殖、侵袭能力有明显的抑制作用,同时可诱导细胞的凋亡,且与PI3K/Akt信号通路相关.