猪附红细胞体MSG1部分基因片段的全基因合成及克隆表达

摘要

通过人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列，提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据GenBank注册的AM407404的544-942氨基酸序列，选择大肠杆菌偏爱的密码子，设计并合成了12条寡核苷酸片段。用PAS方法，全基因合成MSG1部分目的基因，克隆入pjet1.2/blunt载体。经测序证实正确后，构建原核表达载体pET-28c/MSG1，并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中，获得含重组表达质粒的转化子，IPTG诱导表达，并进行SDS-PAGE分析。测序、酶切鉴定等结果表明表达栽体构建成功，诱导表达后大约在16KD的位置出现明显的蛋白条带。