桃SRAP-PCR反应体系建立及半矮生型相关标记初步研究

摘要

SRAP一种多态性和信息量丰富的分子标记技术,其技术简便、快速,不需预知序列信息。近年来广泛应用在植物遗传多样性分析、种质鉴定、遗传连锁图的构建以及比较基因组学研究等方面。本研究以半矮生型桃基因组DNA为模板,通过对影响扩增结果的Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度以及引物浓度等设置梯度,对桃SRAP-PCR反应体系进行了优化,确立了20μl体积最佳的反应体系为:DNA模板25-30ng、10×Buffer 2μl、Mg2+浓度2.5mmol/L、dNTP浓度0.25mmol/L、Taq酶1.1U、引物浓度0.3μmol/L。同时,建立了高效、简便、分辨率高的银染体系。通过建半矮生型和普通型基因池,从266对SRAP引物中筛选出21对与桃半矮生性状相关的SRAP标记,并通过对18个个体的扩增检测,发现了1个与半矮生性状相关的SRAP标记。