巨峰葡萄查尔酮异构酶(CHI)基因的克隆及表达特性的半定量RT-PCR分析

摘要

试验从一年生巨峰扦插苗中克隆了CHI基因，并采用半定量RT-PCR技术，以actin基因为内参，分析了CHI基因在巨峰葡萄果实不同发育阶段及组织的表达。对CHI基因的序列分析表明：CHI基因序列中含有3内含子，4个外显子;生物信息学分析表明，CHI基因编码的多肽链既没有信号肽，也不存在跨膜结构域，且亚细胞定位于细胞质中。半定量RT-PCR分析结果表明，CHI基因在果皮、果肉、种子及幼叶和幼根中都表达，但不同的组织中表达方式不同。CHI基因在花后30和90天的果皮中强烈表达；但在果肉中，CHI，基冈在花斤90天表达强烈，而在种子中于花后45天表达强烈，随果实发育，其表达逐渐下降。在上述实验的同时，高温处理抑制CHI基因在一年生盆栽巨峰葡萄幼叶中的表达，但随处理时间延长，其表达又有所恢复；高温诱导CHI基因在幼根的表达。