中华鳖免疫球蛋白J链基因的克隆与表达

摘要

用RACE-PCR方法扩增出中华鳖免疫球蛋白J(Joining chain)链全长cDNA。其cDNA全长为2,347nt，包含5’非编码区30nt，3’非编码区1，834nt，开放阅读框480 nt，编码160个氨基酸。序列比对分析表明中华鳖免疫球蛋白J链基因与海龟的相似性高达80.7%，与鸡、人、牛、鼠、兔、负鼠、爪蟾、牛蛙和鳐的相似性分别是71.3%、58.5%、59.6%、60.8%、50.9%、64.3%、57.6%、49.4%和35.8%。ClustalX比对结果显示：中华鳖免疫球蛋白J链中存在半胱氨酸的保守位点。进化分析表明，中华鳖免疫球蛋白J链与海龟的J链聚为一枝。RT-PCR检测到J链基因在中华鳖胚胎受精后5天就有表达，而且短时间内持续增加。荧光定量PCR显示灭活的Aeromonashydrophila strain T4诱导中华鳖免疫球蛋白J链的mRNA在脾脏、肾脏和血液中有较高的表达上调，这些表明了免疫球蛋白J链基因在中华鳖早期发育阶段和抵抗微生物感染免疫应答过程中具有重要作用。