孕妇血浆DNA实时荧光定量PCR内参基因的选择

摘要

目的:比较6种在应用孕妇血浆游离DNA进行的无创性产前检测(Non-invasive prenatal tes-ting,NIPT)DNA定量研究中经常使用的6种内参基因(HBB、TERT、GAPDH、ALB、ACTB、TRG)分别在孕妇血浆DNA、非孕妇血浆DNA中的含量稳定性.rn 方法:孕妇及非孕妇各18例,取外周静脉血并提取血浆DNA进行荧光定量PCR扩增,分别应用geNorm,NormFinder和BestKeeper三款统计学软件对Ct值进行分析,根据结果评价内参基因在各样本中的稳定性.rn 结果:孕妇与非孕妇整体组、孕妇组、非孕妇组、母体与胎儿整体组、母源DNA组、胎源DNA组中,含量稳定性最高的基因分别为TERT、ACTB、ALB、HBB、HBB、GAPDH.rn 结论:在孕妇血浆游离DNA中,内参基因的含量稳定性具有显著的差异.在每一个利用qPCR法进行血浆游离DNA的含量分析的研究之前,应该首先评价内参基因在各样品组中的含量稳定性,从而选择一种最为稳定的内参基因.