J亚群禽白血病病毒gp85基因在杆状病毒中的表达及鉴定

摘要

为获得J亚群禽白血病病毒的gp85蛋白，将ALV-J的gp85基因克隆至栽体pFastBac-HTA中，构建重组转座载体pFgp85，并将其转化DH10BacTM大肠杆菌感受态细胞，使gp85基因整合到Bacmid穿梭载体中，获得重组穿梭载体Bacgp85。通过脂质体介导将重组穿梭载体转染Sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒rBac-gp85。通过Western blot和IFA，分析结果表明ALV-J gp85蛋白在Sf9昆虫细胞中获得正确表达，所表达的重组gp85蛋白分子量约为38kDa。ALV-J gp85重组蛋白在Sf9细胞中的表达为其功能研究和应用研究提供了良好的基础。