非抗性筛选生长抑素基因疫苗的稳定性研究

摘要

将非抗性筛选生长抑素真核表达质粒pVGS／2SS-asd电转化双缺失asd／crp基因的减毒猪霍乱沙门氏菌,获得非抗性筛选生长抑素DNA疫苗。通过体外传代培养,检测此真核表达质粒在重组菌中的稳定性,同时,分别以0.2× 1010CFU／只的剂量口服和肌注接种小鼠,探讨重组菌在体内的持续时间及质粒在重组菌中的稳定性。结果表明：体外传代50次后提取质粒,酶切鉴定结果显示质粒在传代过程中没有丢失。此外,重组菌免疫小鼠2d后在肺、脾、肝中均能检测到沙门氏菌,且肌注免疫的菌落数要多于口服免疫,免疫14d后在口服组和肌注组中均检测不到重组菌,菌落PCR结果显示,检测到的重组菌中均可扩增出目的片段,证实以减毒沙门氏菌为载体的重组质粒在免疫小鼠过程中没有丢失。此结果将为非抗性筛选生长抑素基因疫苗的免疫效力检测及临床试验研究提供有力的保障。