松干基褐腐病菌(Inonotus weirii)的分子检测方法

摘要

松干基褐腐病菌(Inonotus weirii)是我国一种重要的植物检疫性病原菌,本文首次建立了检测此病菌的分子检测方法,根据I.weirii与同属其它种的的ITS差异区域设计出一对特异性引物IW1/IW2,经PCR扩增,只有I.weirii可以得出约165bp的产物,而其余作为对照的菌株均无此特异性条带的产生,其检测灵敏度为100pg基因组DNA(25μl反应体系).此外,特异性引物IW1/IW2还适合于Real-time PCR,其检测灵敏度更低为0.1pg基因组DNA(20ul反应体系).运用此两种方法均能成功的从人工污染了I.weirii的木块中检测出病原菌的存在.