乳糖替代IPTG诱导重组融合蛋白猪CCK39/UreB在大肠杆菌的表达

摘要

本研究以乳糖为诱导剂,采用SDS—PAGE和BandScan凝胶分析软件比较分析了诱导时间,诱导剂终浓度、诱导温度、诱导前菌体浓度、氨苄青霉素浓度、培养基起始pH值等因素对融合蛋白表达量的影响,并在这个基础上实现了5L发酵罐放大培养。结果表明,对诱导表达条件进行优化后,乳糖诱导重组融合蛋白CCK39／UreB的表达率最高可达41.8％,达到IPTG的诱导水平;较低的诱导温度能显著提高可洛性融合蛋白的表达水平;在5L发酵罐培养申,融合蛋白表达率和细胞干重的最大值分别可达37.8％和15.37g/L。研究结果为乳糖替代IPTG大规模生产CCK／UreB融合蛋白奠定基础。