实时荧光定量PCR法检测对虾白斑综合征病毒

摘要

对虾白斑病由白斑综合征病毒(WSSV)感染引起，所有养殖对虾对该病高度易感，蟹类、小龙虾、淡水虾以及各种龙虾也易感，但发病率和死亡率有很大差别。多种虾类常表现为持续感染或终身隐性感染。盐度剧烈变化等环境胁迫可能诱发该病爆发流行。隐性感染虾体内的病毒含量极低，现有方法难以检测。建立一种快速、灵敏、准确的检测方法对预防该传染病的发生和流行具有重要的意义。本文应用TaqMan 探针技术设计了探针和引物，建立了检测WSSV的实时荧光定量PCR 方法。对影响PCR 反应的主要因素Mg2+浓度和退火温度等进行了优化，证明当Mg2+浓度为3.5～4.0 mmol，退火温度为59～60℃时可获得最佳的扩增和检测效果。