薄膜分散-探头超声法制备HV12p-rPA脂质体初探

摘要

目的：将采用蛋白质工程技术获得的水蛭素12肽-瑞替普酶抗凝溶栓双功能融合蛋白（HV12p-rPA）制备成脂质体剂型。方法：采用薄膜分散探头超声法制备脂质体，通过正交设计优化处方和工艺;并分别采用BCA试剂盒法比较脂质体包封率，激光粒度仪测量脂质体Zeta电位和粒径，光学显微镜观察脂质体形态，纤维蛋白琼脂糖平板法测量药物体外活性，凝血酶滴定法测量体外抗凝活性。结果：筛选出制备HV12p-rPA脂质体的最佳处方工艺组合为磷脂与胆固醇的比为3：1，药物浓度为4mg/ml，PBS10ml，水浴超声10min。最佳处方中HV12p-rPA脂质体的平均粒径为(142.45±1.20)nm，Zeta 电位平均值为(-14.64±0.48) mV，平均包封率为（91.59±1.39）%，HV12p-rPA脂质体体外溶栓活性和体外抗凝活性分别为7326 IU·mg-1、414ATU·mg-1 。结论：采用薄膜分散探头超声法制备的HV12p-rPA脂质体具有较高的包封率，且保留其生物活性。