应用无细胞系统表达恶性疟原虫环子孢子蛋白

摘要

目的：应用麦胚无细胞蛋白表达系统，表达出恶性疟原虫环子孢子蛋白（Circum sporozoite protein， CSP）。方法：依据PlasmoDB查得的恶性疟原虫Pf3D7株CSP蛋白基因序列，设计一对引物，经PCR扩增出CSP蛋白基因全序列。用NcoI与Sma I双酶切后，与同样双酶切的pIVEX 1.3WG载体连接，转化大肠杆菌DH5а株，获得pIVEX WG 1.3-CSP质粒。将pIVEX WG 1.3-CSP质粒加入到麦胚表达系统进行表达，表达产物使用镍离子亲和层析柱纯化，获得重组CSP。结果：PCR成功扩增出CSP基因序列，成功构建pIVEX WG 1.3-CSP质粒，经WB验证，该重组质粒在麦胚表达系统中成功地表达了CSP。结论：使用麦胚系统表达的CSP，可用于疟疾诊断试剂和疫苗评价方面的研究。