即时定量聚合酶链反应法定量测定乙肝病毒DNA

摘要

目的：建立实时定量PCR法测定血清样品中乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)含量。方法：用PEG-裂解-煮沸法从血清中提取核酸，制作成标准浓度曲线后，对100份患者样本进行实时荧光定量分析，并与ELISA(酶标法)结果作比较，再与CAP-CTM法进行比较。结果：用SPSS(v.16)软件进行统计分析，得线性回归方程Y=-3.212X+44.90；r2=0.9980；日内、日间平均误差为RSD<2.15%；最低检测限是400copies/mL(拷贝数)：该法测得患者HBV DNA的浓度与ELISA测出样品阳性发生率呈正相关，再与CAP-CTM(化学发光法)作配对t检验，二者无显著性差异。结论：新建的PCR检测法敏感度高，重现性好，线性范围较广，可用于进行临床血清样本中HBV DNA的定量检测，这对评估HBV患者诊治效果有帮助。