海州香薷铜胁迫全长cDNA文库的构建与分析

摘要

海州香薷是我国重要的铜耐性植物，为了揭示其耐铜分子机理，本研究以缺铜(0 μmol/LCuSO4)和高铜(100 μmol/L CuSO4)处理3 h、6 h和24 h的根尖为建库材料，提取总RNA，以等量混合后纯化的mRNA作为反转录模板，采用SMART和LD-PCR技术合成双链cDNA，构建海州香薷缺铜和高铜胁迫cDNA文库。构建的缺铜胁迫cDNA原始文库滴度为1.22E+08 pfu/mL，文库所含独立克隆数为6.41E+07个，扩增文库滴度为3.96E+12 pfu/mL，重组率为98％，插入片段82％大于500 bp。高铜胁迫cDNA原始文库滴度为3.44E+07pfu/mL，文库所含独立克隆数为1.81E+07个，扩增文库滴度为4.86E+12pfu/mL，重组率为99％，插入片段79％大于500 bp。两个文库质量符合标准要求。