Trx-Gcthionin融合蛋白酸切割过程的内源荧光研究

摘要

本文采用稳态荧光光谱学手段研究了硫氧还蛋白融合的Gcthionin在酸切割过程中内源荧光的变化，发现在pH～6．8中性缓冲体系中，当激发波长为260或280 nm时，融合蛋白中酪氨酸和色氨酸的荧光均有贡献。当向体系中加人HCl，调节pH至1．4时，酪氨酸在305nm的荧光发射明显增强，而Trp的荧光强度变化不大。随着酸处理时间的延长，色氨酸的磷光发射逐渐增强，而Trp的λmax无明显变化。而当体系pH值调至中性后，Trp的荧光发射占主导地位。上述现象表明，酸诱导融合蛋白中Tyr局部微环境发生变化，导致Tyr→Trp的能量传递效率降低。至于酸处理后Trp磷光增强的现象可能与目标蛋白的释放和二硫键远离有关。