脑脊液感染常见病原菌基因芯片检测方法的初步研究

摘要

目的:初步建立一种应用基因芯片及导流杂交技术快速检测脑脊液常见病原菌的方法.方法:以细菌16S rDNA和23S rDNA序列设计通用引物和寡核苷酸探针,将活性氨基标记的探针依次固定在BiodyneC膜上,制成检测芯片,用标记生物素的引物进行PCR扩增,将扩增产物与检测芯片在核酸分子快速杂交仪上进行杂交,根据显色情况判断结果;应用该方法检测8种脑脊液常见病原菌标准菌株及临床菌株.结果:标准菌株与临床菌株扩增产物均与相应探针产生杂交信号,特异性100％,灵敏度最低为103CFU/ml.结论:本研究建立了一种快速、敏感、准确的以DNA为基础的鉴定脑脊液感染病原菌的方法.