Let-7家族在耳蜗前体细胞分化前后的表达

摘要

目的：microRNA let-7包括多个家族成员，其序列和功能在不同物种中高度保守。研究发现let-7可通过靶向作用细胞周期分子调控干细胞的增殖、分化。耳蜗前体细胞具有自我更新能力及多向分化潜能，可分化为毛细胞、支持细胞等多种细胞类型，为我们提供了研究毛细胞发育及促再生研究的体外模型。本研究通过观察let-7家族在耳蜗前体细胞增殖、分化中的表达变化，探讨利用let-7诱导耳蜗毛细胞再生的可能性。rn 方法：用microRNA芯片对分化前后的前体细胞进行初步分析，再用实时定量PCR技术验证芯片结果。分别收集未分化的前体细胞球及分化6天的细胞，提取总RNA，通过质量检测后用Hy3标记探针，用LNA microRNA芯片进行杂交，然后扫描芯片并分析microRNA表达荧光信号强度，经过信号标准化和数据处理后绘制microRNA的表达模式图。用micorRNA实时定量PCR技术验证芯片结果，检测let-7a和let-7f在细胞分化前后中的表达变化。rn 结果：芯片结果发现let-7家族中let-7a和let-7f在耳蜗前体细胞分化过程中有表达。实时定量PCR结果显示，let-7a和let-7f具有相似的表达模式，在分化细胞中表达水平显著高于未分化细胞。