CHFR基因CpG岛甲基化状态对食管癌Eca109细胞增殖凋亡的研究

摘要

目的：研究CHFR基因启动子甲基化状态与食管癌Eca 109细胞增殖凋亡的关系。方法：分别用不同浓度5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理食管癌Eca109细胞,用MSP法检测CHRF基因CpG岛的甲基化状态,RT-PCR检测CHFR mRNA的表达情况,MTT法及流式细胞仪检测不同浓度5-Aza-CdR处理对Eca109细胞增殖及凋亡的影响。结果：食管癌Eca 109细胞CHFRCpG岛处于高甲基化状态,通过用不同浓度5-Aza-CdR处理食管癌Eca109细胞后CpG岛高甲基化状态可以发生部分去甲基化。RT-PCR检测发现Eca109细胞CHFRmRNA无表达,分别用2μmol/L,5μmol/L,10μmol/L的5-Aza-CdR处理后出现表达,相对表达量分别为：0.174±0.010,0.221±0.013,0.356±0.014,差异有统计学意义(P＜0.05)。MTT法检测不同浓度5-Aza-CdR处理Eca109细胞可抑制增殖,差异有统计学意义(P＜0.05)。流式细胞仪检测未处理及分别用2μmol/L,5μmol/L,10μmol/L的5-Aza-CdR处理后Eca109细胞的凋亡率分别为：1.83±0.41％,7.46±1.5％,16.2±1.6％,25.3±2.3％,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：食管癌Eca109细胞经5-Aza-CdR处理后,CHFR基因CpG岛发生部分去甲基化,出现CHFR mRNA表达,并抑制细胞增殖促进细胞凋亡。