银杏内酯B对内皮祖细胞氧化损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的:观察银杏内酯B对氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人外周血内皮祖细胞(EPCs)氧化损伤的影响,并探讨其可能的作用机制.rn 方法:采用密度梯度离心法分离出入外周血单个核细胞(MNC),培养3天后,用培养液洗去未贴壁细胞,得到的贴壁细胞继续培养.培养至第6天,收集贴壁细胞用不含胎牛血清的M199培养液培养24 h后,采用流式细胞术分析培养细胞来证实培养细胞的内皮属性,观察培养细胞的形态特征以鉴定EPCs.将培养24h后的细胞随机分成4组:正常对照组,氧化低密度脂蛋白损伤组(含0.05mg/ml Ox-LDL)、银杏内酯B 0.05mg/ml保护组、银杏内酯B 0.1 mg/ml保护组.干预24 h后,采用CCK8试剂盒测定观察EPCs的活力;并取各组细胞裂解液用SOD、MDA试剂盒进行超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量检测.rn 结果:人外周血内皮祖细胞与Ox-LDL共同孵育24h后,细胞CCK8试剂盒OD值明显低于正常组(P＜0.01),银杏内酯B保护各组的细胞存活率显著升高(P＜0.01).Ox-LDL损伤组的细胞裂解液SOD含量(U/ml)明显降低(P＜0.01),MDA含量(nmol/ml)明显升高(P＜0.01),在银杏内酯B不同浓度与Ox-LDL共同干预24h后,与单纯Ox-LDL损伤组比较,细胞裂解液SOD含量明显增高(P＜0.01),呈明显的剂量依赖性(P＜0.01).同时银杏内酯B保护各组的细胞裂解液MDA含量较Ox-LDL组明显降低(P＜0.01).rn 结论:银杏内酯B对Ox-LDL诱导的EPCs氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高了该细胞的超氧化物歧化酶活性及清除脂质过氧化产物丙二醛有关.