血小板微颗粒对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

摘要

目的:检测血小板微颗粒(platelet-derived microparticles,PMPs)诱导后的人脐静脉内皮细胞(HUVECs) CRL-1730血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的表达及其传导通路。探讨PMPs影响内皮细胞VEGF释放的可能机制及其临床意义。rn 方法:常规培养HUVECs,配制不同干预浓度的PMPs与HUVECs共培养不同时间,应用半定量逆转录聚合酶链式反应技术测定内皮细胞VEGF、VEGFII型受体Flt/KDR、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3kinase,PI3K)以及胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK) mRNA的表达水平。rn 结果:(1)不同浓度PMPs干预HUVECs,VEGFmRNA的表达水平在对照组(未干预组)显著高于PMPs干预组,干预浓度分别为10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml、100pg/ml组(均P<0.05),与之相反,VEGFⅡ型受体Flt/KDR mRNA表达水平在对照组显著低于四组不同浓度PMPs组mRNA表达水平(均P<0.05)。ERKmRNA表达水平在PMPs 50μg/ml组显著高于对照组(1.141 vs 0.749,P=0.004),PI3KmRNA表达水平在PMPs100μg/ml组显著高于对照组(1.344 vs 0,999,P=0.004)。(2) PMPs干预细胞不同时间,VEGFmRNA的表达水平在对照组显著高于PMPs干预24小时组(0.318 vs 0.746,P<0,001),KDR mRNA的表达水平在对照组显著低于PMPs干预4小时、24小时组(均P<0.05),PI3KmRNA表达水平在PMPs干预24小时组显著高于对照组(2.622 vs 0.999,P=0.004)。rn 结论:PMPs可能通过VEGF受体,激活其下游信号转导通路,发挥促进血管和血管发生为基础的生物学效应。