线粒体途径

摘要： 目的:观察红芪多糖对SCL-1细胞凋亡的调控作用,并探究其作用机制。方法:红芪多糖(25、50、100μg/mL)处理SCL-1细胞,0μg/mL红芪多糖处理的SCL-1细胞设为对照组;细胞计数法(CCK8)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素-碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞增殖抑制率、细胞凋亡率,筛选50μg/mL浓度为红芪多糖最适浓度。JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位,蛋白免疫印迹(WB)实验检测细胞中分裂的多聚DNA核糖聚合酶(Cleaved PARP)、Cleaved半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Cleaved Caspase-9及细胞浆、线粒体中细胞色素C(Cytochrome c)、第二个线粒体衍生的caspases激活剂(Smac)、B细胞淋巴瘤/白血病2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病2家族促凋亡基因(Bak)的蛋白表达。结果:与对照组相比,红芪多糖(25、50、100μg/mL)组SCL-1细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),确定50μg/mL红芪多糖为最适浓度。与对照组相比,红芪多糖组SCL-1细胞线粒体膜电位显著降低(P<0.05),线粒体凋亡相关蛋白Cleaved PARP、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9表达显著升高(P<0.05),线粒体释放Cytochrome c、Smac蛋白表达显著升高(P<0.05),线粒体Bax、Bak蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:红芪多糖促进皮肤鳞癌细胞SCL-1凋亡,其机制为激活线粒体途径。

摘要： 目的探讨华蟾素诱导人鼻咽癌CNE-2细胞增殖抑制、凋亡的作用机制。方法将人鼻咽癌CNE-2细胞分为阴性、阳性对照组及华蟾素给药组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同水平华蟾素对人鼻咽癌细胞的增殖抑制情况;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色法观察药物对细胞形态的影响;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率;免疫印迹法(Westernblot)检测线粒体凋亡途径相关蛋白细胞色素C(Cyt-C)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的表达。结果MTT法检测显示,与阴性对照组相比,阳性对照组及华蟾素组可抑制鼻咽癌CNE-2细胞的增殖,倒置荧光显微镜下可见活细胞、凋亡细胞及坏死细胞,抑制率、凋亡/坏死细胞数量与药物剂量和作用时间呈正相关。FCM检测结果显示,华蟾素作用于CNE-2细胞24、48h后,各华蟾素组凋亡率均高于阴性对照组,且随着华蟾素药物水平升高、作用时间延长,凋亡率也升高,差异有统计学意义(P<0.05);Westernblot检测结果显示,与阴性对照组相比,阳性对照组和不同剂量的华蟾素组作用于CNE-2细胞24、48h后Cyt-C、caspase-9蛋白的表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论华蟾素对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖具有抑制作用,并能诱导鼻咽癌细胞凋亡,其机制可能是通过上调Cyt-C、caspase-9蛋白的表达实现的。

摘要： 目的探讨丹参酮ⅡA对人膀胱癌J82细胞增殖与凋亡效应及作用机制。方法以不同浓度(1、2、3、5、8μmol/L)的丹参酮ⅡA处理J82细胞48 h,先后采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测法检测梯度剂量的丹参酮ⅡA对J82细胞半数抑制率(IC50)的测定及细胞增殖的影响,流式细胞术及Annex V/PI染色检测法用于检测丹参酮ⅡA对J82细胞凋亡及细胞周期的影响,免疫印迹法(Western-blotting)检测与细胞;周亡相关的蛋白cyclin Dl、Bel-xL、caspase3、caspase8、caspase9、P65表达的差异。结果丹参酮ⅡA能够抑制人膀耽癌J82细胞的活性,且具有浓度依赖性(P<0.05),半数抑制浓度(IC50)为4.16μmol/L。1、3μmol/L丹参酮ⅡA处理组的G1期细胞百分比分别为(47.98%±1.49%)、(54.94%±3.39%),均高于对照组(42.22%±0.48%)(均P<0.05),且3μmol/L组高于1 pmol/L组(P<0.05);3μmol/L组的S期细胞百分比(33.19%±4.17%)低于对照组(46.32%±2.14%)(P<0.05)。1、3、5μmol/L组的总凋亡率分别为11.23%、14.84%、18.42%,均高于对照组的3.26%(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。1、3 pmol/L组的caspase3蛋白相对表达量分别为(0.39±0.02)、(0.52±0.03),均高于对照组的0.26±0.02(P<0.05);caspase9蛋白相对表达量分别为(0.18±0.03)、(0.33±0.12),均高于对照组的0.02±0.02(P<0.05);3μmol/L组两种蛋白的表达量均高于1μmol/L组(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA在体外可抑制J82细胞增殖,G1/S期阻滞可能是其中的机制之一,同时可能通过线粒体途径诱导J82细胞凋亡。

摘要： 为探究Chaetoglobosins E(ChE)对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响,体外培养人乳腺癌MCF-7细胞、人膀胱癌T-24细胞、人黑色素瘤C8161细胞、人白血病U937细胞,用不同浓度的ChE分别作用于4种细胞24 h或48 h,MTT法检测4种肿瘤细胞的增殖情况;为进一步研究其作用机制,Hoechst 33342染色观察MCF-7经ChE处理后细胞形态的变化,流式细胞术检测MCF-7经ChE处理后细胞凋亡、周期、活性氧以及线粒体膜电位的变化情况,Western Blot法检测MCF-7细胞中凋亡相关蛋白的表达情况。结果显示:ChE对MCF-7、T-24、C8161和U937细胞增殖均有抑制作用,且均呈现出时间和剂量依赖性,4种肿瘤细胞中,ChE对MCF-7增殖的抑制效果最强,24、48 h的IC_(50)分别为82.04±7.01、49.87±2.28μmol/L;Hoechst 33342染色发现,随着ChE浓度的升高,凋亡的MCF-7细胞数逐渐增多,细胞凋亡特征显著,细胞核的体积缩小,细胞核裂解并伴有凋亡小体;通过流式细胞术发现,MCF-7细胞经ChE处理后,细胞凋亡增加、细胞周期改变、活性氧增加以及线粒体膜电位降低;Western Blot实验发现,Bid、Caspase 3蛋白的表达量降低,Cleaved Caspase 3、Bax蛋白与Bcl-2蛋白表达量的比值增加。综上所述,ChE诱导的MCF-7细胞凋亡与Caspase依赖性线粒体途径有关。

摘要： 目的探究下调miR-221诱导人胃癌细胞凋亡的机制,及其对胃癌细胞化疗敏感性的影响。方法实时荧光定量PCR检测正常胃黏膜上皮细胞NGEC与4种胃癌细胞系(SGC-7901、BGC-823、MGC803、MKN-28)中miR-221表达水平;将SGC-7901细胞随机分为5组:空白对照组(常规培养)、Anti-miR-NC组(转染inhibitor control)、Anti-miR-221组(转染miR-221 inhibitor)、Anti-miR-221+siRNA-NC组(转染miR-221 inhibitor后再转染siRNA阴性对照)、Anti-miR-221+siRNA-Parkin组(转染miR-221 inhibitor后再转染siRNA-Parkin),Lipofectamine 2000脂质体介导法转染SGC-7901细胞。MTT法检测细胞活性;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位;Western blot检测自噬相关蛋白的表达水平;Hoechst 33342染色和AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况。使用不同浓度奥沙利铂(2.5、5、10、20、40、80μg/mL)处理各组SGC-7901细胞48 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,计算IC50。结果4种胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MGC803、MKN-28的miR-221相对表达水平较正常胃黏膜上皮细胞NGEC升高(P<0.05)。与空白对照组比较,Anti-miR-221组SGC-7901细胞在转染24、48、72 h时活性下降,细胞线粒体膜电位下降,Pink1、Parkin蛋白表达水平升高,P62蛋白表达水平下降,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,细胞核浓缩并有碎裂的蓝色凋亡体,细胞凋亡率升高,经过奥沙利铂处理后细胞增殖抑制率升高,IC50下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与Anti-miR-221组比较,Anti-miR-221+siRNA-Parkin组SGC-7901细胞在转染48 h和72 h时活性升高,细胞线粒体膜电位升高,Pink1、Parkin蛋白表达水平下降,P62蛋白表达水平升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值下调,细胞核浓缩明显减少,细胞凋亡率降低,经过奥沙利铂处理后细胞增殖抑制率下降,IC50升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论下调miR-221表达可通过调节Parkin介导的线粒体自噬途径诱导胃癌细胞发生凋亡,增加胃癌细胞对奥沙利铂的化疗敏感性。

摘要： 目的:探讨PI3K/AKT介导线粒体途径血小板凋亡在免疫性骨髓衰竭血小板减少中的机制。方法:将小鼠随机分为正常组(n=10)、模型组(n=10)和环孢素(CSA)组(n=10)。正常组及模型组分别给予生理盐水灌胃;CSA组给予0.027 g/kg CSA灌胃。造模3 d后处死小鼠,从尾静脉处抽血,用全自动血细胞分析仪测定血小板计数并制备洗涤血小板。采用流式细胞仪检测Bax、Bad、caspase-9的表达;使用Western blot法测定Bax、Bad、caspase-9、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的蛋白含量;运用Real-time Quantitative PCR(QPCR)法检测PI3K mRNA、AKT mRNA的表达。结果:与正常组相比较,模型组小鼠的血小板数量明显减少,洗涤血小板中的Bax、Bad、Caspase-9明显升高(P<0.05),同时,p-PI3K、p-AKT蛋白含量及PI3K mRNA和AKT mRNA表达水平则明显下降(P<0.05);与模型组相比较,CSA组洗涤血小板中的Bax、Bad、Caspase-9明显下降(P<0.05),而p-PI3K、p-AKT蛋白含量及PI3K mRNA、AKT mRNA表达水平则明显上升(P<0.05)。结论:在免疫性骨髓衰竭血小板减少中,PI3K/AKT介导线粒体途径血小板凋亡起重要作用。

摘要： 目的:探讨α-苦瓜素(α-MMC)对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞的增殖抑制作用及通过激活细胞信号传导通路调控细胞凋亡的分子机制。方法:通过CCK-8法检测α-MMC对HSC-3细胞的增殖抑制作用;利用PI、Annexin V-FITC/PI、JC-1染色及流式细胞术测定α-MMC对HSC-3细胞周期、凋亡、线粒体膜电位的影响;通过蛋白免疫印迹技术判断α-MMC作用后,HSC-3细胞凋亡相关蛋白及信号通路蛋白的表达情况。结果:CCK-8分析结果显示,α-MMC以药物浓度和时间梯度依赖的方式抑制HSC-3细胞增殖,其24 h和48 h的IC50值分别为50.38μg/mL和20.17μg/mL;流式细胞术检测发现,α-MMC阻滞HSC-3细胞周期于G2/M期,降低细胞线粒体膜电位,诱导细胞凋亡;蛋白免疫印迹结果显示,α-MMC上调促凋亡蛋白Bim表达,下调抗凋亡蛋白Mcl-1的表达;激活JNK信号通路,即上调p-MKK4、p-JNK、p-c-Jun的表达水平。结论:α-MMC对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞具有增殖抑制作用,其机制可能是α-MMC激活JNK信号通路触发细胞周期阻滞,并通过线粒体途径诱导细胞凋亡。

摘要： 本文以B淋巴瘤Ramos细胞为研究对象,探讨α-倒捻子素(α-mangostin,α-Ma)对B淋巴瘤的增殖抑制作用并初步阐释其分子机制。首先通过CCK-8法探究α-Ma对Ramos细胞的增殖抑制作用;再利用倒置显微镜成像法观察α-Ma对Ramos细胞形态的影响;随后利用DCFH-DA、JC-1、Annexin V-FITC/PI荧光染色和流式细胞术检测α-Ma对Ramos细胞活性氧水平、线粒体膜电位、凋亡的影响;并通过蛋白免疫印迹技术测定α-Ma作用Ramos后细胞凋亡相关蛋白及信号通路蛋白的表达情况。CCK-8分析结果显示,α-Ma以药物浓度依赖和时间依赖的方式抑制Ramos细胞增殖,其24 h和48 h的IC值分别为14.84μmol/L和8.087μmol/L;倒置显微镜成像法发现α-Ma能减少Ramos细胞数量并诱导细胞形态发生凋亡样改变;流式细胞术检测发现,α-Ma能增加Ramos细胞内活性氧水平、降低细胞线粒体膜电位,同时诱导细胞凋亡;蛋白免疫印迹结果显示,α-Ma下调caspase-3/9的表达,上调cleaved caspase-3/9、cleaved PARP、Bax、Bim和p-p38 MAPK的表达。综上所述,α-Ma对B淋巴瘤Ramos细胞具有增殖抑制作用,其可能机制是α-Ma活化ROS/p38 MAPK/Bax级联反应诱导B淋巴瘤细胞凋亡。

摘要： 目的 研究滇乌碱对大鼠心肌损伤的影响及其线粒体凋亡途径相关机制。方法 采用随机数字表法将40只SD大鼠随机分为正常组(生理盐水),滇乌碱高、低剂量组(0.14、0.09 mg/kg),乌头碱组(阳性对照,0.88 mg/kg),每组10只,每天灌胃给药1次,连续7 d。检测大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和心肌组织中活性氧(ROS)水平,观察大鼠心肌组织病理形态学和心肌组织线粒体超微结构变化情况,检测大鼠心肌细胞凋亡情况,检测大鼠心肌组织中B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶9(caspase-9)、活化的胱天蛋白酶9(cleaved-caspase-9)、caspase-3和cleaved-caspase-3蛋白相对表达水平。结果 与正常组比较,滇乌碱高、低剂量组大鼠血清中LDH、CK、CK-MB、MDA水平和心肌细胞凋亡数量及心肌组织中ROS水平、caspase-3蛋白表达水平均显著升高/增加(P<0.05或P<0.01),血清中SOD水平和心肌组织中Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.01),且滇乌碱高剂量组大鼠心肌组织中caspase-9、cleaved-caspase-9、caspase-3、cleaved-caspase-3蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05);两组大鼠均出现了心肌纤维排列紊乱、线粒体肿胀等病理变化。结论 滇乌碱可引起大鼠心肌细胞损伤。其机制可能与破坏心肌细胞膜的完整性,使心肌细胞发生氧化应激,诱导心肌细胞通过线粒体途径发生凋亡有关。

摘要： 糖尿病周围神经病变(Diabetic peripheral neuropathy,DPN)是糖尿病(Diabetes mellitus,DM)终末期并发症,为DM神经病变的主要形式,临床具有高病发率、高致残率特点,严重危害患者的生命健康.研究表明,在DPN外周神经系统中存在大量施万细胞及神经元凋亡,但其具体发病机制仍有待拓展.线粒体作为动力源泉和代谢中心,在凋亡调控方面扮演关键角色,其途径及相关信号通路的调节可防治DPN.文章就线粒体凋亡途径及其相关调控通路与DPN的关系进行综述,为进一步探讨DPN的病变机制提供一些借鉴和参考.

摘要： 目的：探讨植酸(phytic acid,IP6)如何通过线粒体途径诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,为研究IP6的抗肿瘤作用提供理论依据.rn 方法：应用Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞仪Annexin-FITC/PI双染法观察不同浓度IP6作用HepG2细胞后的凋亡情况;流式细胞仪检测IP6作用HepG2细胞后线粒体膜电位(ΔΨm)的变化;RT-PCR法检测HepG2细胞内Caspase-3mRNA的表达变化;Western Blot法检测IP6作用HepG2细胞后Cyt-c的表达变化.rn 结果：荧光显微镜下可观察到IP6作用后细胞出现明显的凋亡形态;与对照组相比,IP6可升高细胞凋亡率(F=342.15,q=2.9～28.53,P＜0.05),且随着浓度增加,凋亡率逐渐升高(P＜0.05);IP6可降低线粒体膜电位(F=14802.610,q=101.531～209.237,P＜0.05),且随着浓度增加,膜电位逐渐降低 (P＜0.05);IP6可增加Caspase-3mRNA的表达(F=30.474,q=3.406～9.103,P＜0.05),且随着浓度增加,表达逐渐增加(P＜0.05);IP6可上调细胞色素C(Cyt-c)的表达(F=87.194,q=5.246～15.218,p ＜0.05),且随着浓度增加,表达逐渐上调(P＜0.05).rn 结论：IP6可通过降低线粒体膜电位,上调细胞色素C水平,激活Caspase-3途径,促进人肝癌HepG2细胞发生凋亡.

摘要： 凋亡参与了缺血缺氧性脑损伤后的病理过程，当发生缺血缺氧后，有多条通路可以分别独立地引发细胞凋亡，其中的线粒体途径越来越受到重视，多种促和抗凋亡因素作用于线粒体，引发线粒体功能和生化方面的改变，从而决定细胞损伤后的命运。线粒体凋亡途径的主要环节有凋亡刺激物的生成，线粒体通透性的改变，线粒体凋亡因子的释放，caspase家族的激活等，如果能对上述环节加以阻断，则可抑制神经元的过度凋亡从而减轻缺血缺氧性脑损伤。临床研究及动物实验均证实高压氧治疗可以起到减轻神经元凋亡的作用，但因其作用机制复杂，故尚未完全明确，本文将就高压氧治疗对线粒体凋亡途径的可能机制做一探讨。

摘要： 目的:探讨了槲皮素及其衍生物槲皮甙对联和炎症因子诱导24h引起的胰岛β细胞RINm5F损伤的保护作用及机制.rn 方法:采用MTT方法检测了细胞死亡情况,放射免疫方法检测了葡萄糖刺激下的胰岛素释放(GSIS),通过流式细胞仪检测了细胞间活性氧族(二氯荧光黄)及一氧化氮(NO)的浓度,通过western blotting检测了炎症及凋亡相关蛋白的表达,如细胞色素c、Bax(线粒体),核因子-κB (NF-κB)(细胞核),抑制型κBα (IκBα),诱导型一氧化氮合酶(iNOS),caspase-3等。rn 结果:研究发现,槲皮素及槲皮甙有效的保护了炎症因子诱导下的胰岛细胞死亡及损伤的GSIS,抑制了ROS及NO的产生,并抑制了iNOS的表达,这些效果可能与NF-κB核转运的抑制有关.并且线粒体细胞色素c释放的抑制及其下游蛋白改变预示线粒体凋亡途径也参与槲皮素发生作用的机制中.rn 结论:槲皮素及槲皮甙有效的保护了炎症因子环境下的胰岛β细胞损伤,具有改善糖尿病的开发潜能,并且,槲皮素比槲皮甙显示了更为突出的作用。

摘要： 本研究构建了表达靶向鸡HSP70的短发夹样结构小干扰,RNA(ShRNA)质粒载体系统,转染鸡胚成纤维细胞(CEF),并检测干涉HSP70表达后细胞的凋亡情况,同时用荧光定量PCR测定凋亡相关基因Caspase3和Caspase8的表达水平。结果显示：与未干涉组相比，干涉后18、24、28h，CEF细胞中HSP70的表达水平分别下降了75％、83％和96％,凋亡细胞随着干涉时间的延长而上升；与此同时,Caspase3的表达分别上调至250％、140％、和110％,而Caspase-8的表达则分别下降至76％、80％和34％。由此可见，抑制CEF中HSP70的表达可诱导细胞凋亡，主要是通过促进caspase-3的表达、抑制Caspase-8的表达实现的，因此推测鸡HSP70可能通过线粒体途径保护CEF细胞对抗凋亡。

摘要： 目的：探讨大黄素促进入混合培养淋巴细胞凋亡的作用机制，为进一步研究大黄素的免疫抑制作用奠定良好的实验基础。方法：建立混合淋巴细胞培养模型，给予不同浓度大黄素(1μM、10μM、100μM)培养24、48、72h后检测各组淋巴细胞凋亡、细胞内活性氧及线粒体膜电位情况。Westezn-blot法检测共培养48h后淋巴细胞中细胞色素C、caspase-3、caspase-9、Bcl-2/Bax蛋白表达变化。给予还原性谷胱甘肽(GSH)清除细胞内活性氧后，检测其对线粒体膜电位及淋巴细胞凋亡的影响。结果：随着培养时间和药物浓度的增加，大黄素对淋巴细胞增殖抑制和促凋亡作用逐渐增强，呈现浓度和时间依赖性：高浓度大黄素提高细胞内活性氧、降低线粒体膜电位水平，激活线粒体凋亡通路；使用还原性谷胱甘肽清除细胞内活性氧后，能够降低线粒体膜电位和淋巴细胞凋亡率。结论：线粒体信号途径的激活在大黄素促淋巴细胞凋亡中发挥重要作用。

摘要： 目的:研究JYD207 体外抗肿瘤活性及其诱导癌细胞凋亡的部分作用机制。rn 方法:采用MTT法测定IC50值，使用倒置显微镜进行细胞形态学观察，用流式细胞术检测JYD207 诱导细胞凋亡率的情况，并使用Western Blot检测JYD207 对线粒体通路相关蛋白表达的影响。rn 结果:JYD207 能显著抑制食管癌细胞的增殖，并能显著诱导细胞凋亡，且呈药物浓度依赖性。p53 表达上调且其下游靶点Bax被激活，cytochrome c 从线粒体释放到细胞质，Caspase-9/3 被活化引起细胞凋亡。rn 结论:JYD207 对食管癌细胞有明显的抑制生长及诱导凋亡作用，其作用机制可能是通过p53 介导的线粒体凋亡途径实现的。

摘要： 目的:观察中药野菊花提取物(CIE)对人肝癌MHCC97H细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。rn 方法:体外培养人肝癌MHCC97H细胞,以400,800,1200μg/ml的CIE(实验1、2、3组)作用于MHCC97H细胞,并设立空白对照组。分别于药物作用24、48、72 h时,应用MTT 法检测细胞增殖情况。于药物作用24 h时,采用AnnexinV-FTTC/PI双染检测细胞凋亡、Rho123检测细胞线粒体膜电位(△ψm)变化;Western blot检测细胞色素C、Caspase-9、-3的蛋白表达。rn 结果:三种浓度的CIE对MHCC97H细胞的增殖均有明显的抑制作用,且呈明显的时间和浓度依赖性。与对照组相比,各实验组MHCC97H细胞的凋亡率明显增高P(＜0.05),线粒体膜电位水平明显降低(P＜0.05),细胞色素C、Caspase-9和-3的蛋白表达显著增强(P＜0.05),以上各项均呈明显的量效关系。rn 结论:野菊花提取物对肝癌MHCC97H的增殖具有抑制作用,这可能与药物诱导肝癌细胞凋亡有关。线粒体途径可能是CIE诱导MHCC97H细胞凋亡的主要机制之一。

摘要： 本研究将HeLa细胞培养于含体积分数为10%的小牛血清,100U/ml的青霉素和链霉素的DMEM培养液的培养瓶里,并孵育在含5%CO2的37°C培养箱里。使用0.25%胰蛋白酶溶液进行消化、传代,取生长良好的细胞进行实验。探讨甘草素对人宫颈癌HeLa细胞抑制及诱导凋亡的机制,为甘草素抗肿瘤提供科学依据。

摘要： 本申请提供了使用RNAi技术，特别是用siRNA沉默细胞中线粒体基因表达，或清除细胞中线粒体基因表达产物的方法，应用和相应药物。实验结果表明，使用相应siRNA可以有效敲低线粒体中所有基因表达，并且恢复突变线粒体基因带来的功能缺失或损害。

摘要： 本发明提供一种具有线粒体定位还原TCA途径的高产琥珀酸酵母工程菌株及其构建方法和应用，属于微生物及发酵工程技术领域。本发明是在酵母细胞中将琥珀酸生物合成途径的相关酶类超表达并定位至线粒体基质，有助于还原TCA途径在真核微生物中的功能表达。所述菌株能够利用普通碳源和氮源，经分批补料发酵培养后，琥珀酸产量达到50.1g/L，转化率达到0.75g/g葡萄糖。作为一种高效生产琥珀酸的优良菌株，在食品、化工及可降解材料等领域具有良好的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种在线粒体中构建3-羟基丁酮合成途径的方法及应用，属于遗传工程领域。本发明通过线粒体信号肽(COX4)介导目的基因的表达，实现了在光滑球拟酵母(Torulops is glabrata CCTCC M202019)线粒体中过量表达外源乙酰乳酸合成酶(ALS)和乙酰乳酸脱羧酶(ALDC)基因，成功构建了3-羟基丁酮的合成途径，进而疏通丙酮酸流向3-羟基丁酮的碳代谢流，最终实现了3-羟基丁酮的积累。本发明公开的光滑球拟酵母基因工程菌在多重维生素限制的条件下，可实现3-羟基丁酮的积累，产量可达750mg/L，为研究在亚细胞器中实现代谢工程改造奠定了基础。

摘要： 本文提供与反应性脂质物质反应以形成无毒产物或活性产物的化合物。还提供了还原反应性脂质物质的方法。另外提供了在患有线粒体功能障碍的患者中治疗线粒体的方法。在其他实施例中，提供了一种化合物，其与在线粒体中存在的活化剂反应以形成抑制或增强线粒体通透性转化孔(MPTP)的开放的活性产物。在另外的实施例中，提供了抑制或增强MPTP的开放的方法。还提供了能够穿过血脑屏障(BBB)进入中枢神经系统(CNS)的非极性化合物。

摘要： 本公开涉及从细胞获得线粒体的方法，通过此类方法获得的线粒体和通过此类方法获得的线粒体的用途。

摘要： 根据本发明，提供了一种包含具有较小尺寸的线粒体的群体和将线粒体包裹在封闭空间中的基于脂质膜的囊泡的群体的组合物，以及生产所述组合物的方法。

摘要： 本发明公开了一种pEGFP‑N1‑Bli‑sir2表达载体的设计与构建原理，在携带卡那霉素抗性遗传标记的荧光表达载体pEGFP‑N1上导入地衣芽孢杆菌sir2蛋白基因组DNA，构建了了能高效表达地衣芽孢杆菌sir2蛋白的pEGFP‑N1‑Bli‑sir2质粒。过氧化氢诱导的线粒体功能障碍HaCaT细胞模型实验证明，在细胞水平上，Bli‑sir2蛋白能恢复线粒体的损伤，使细胞ATP水平趋于正常，并降低了活性氧的产生。线粒体神经胃肠型脑肌病小鼠模型实验证明，在动物层次上，经Bli‑sir2的阳离子脂质体治疗后，疾病模型小鼠脑组织和肝组织的ATP含量升高，ROS水平下降，细胞色素c氧化酶活性升高，线粒体DNA增加，线粒体功能改善；线粒体动力学Mfn1和Mfn2和自噬蛋白PINK1、Parkin及LC3 I/LC3 II的表达水平升高。本发明为Bli‑sir2蛋白在细胞线粒体相关肌病及线粒体脑肌病的防治药物中的应用。

摘要： 本发明提供了富集有功能性线粒体的人类干细胞，其中健康的功能性外源线粒体占线粒体富化的人类干细胞中总线粒体的至少3％并少于33％。还公开了生产此类细胞的方法及其用于治疗原发性线粒体疾病的用途。

摘要： 本发明涉及一种利用解脂耶氏酵母线粒体途径定位合成α‑红没药烯的方法，属于分子生物学技术领域。本发明首次在严格好氧微生物解脂耶氏酵母中将甲羟戊酸合成途径过表达并定位至线粒体合成α‑红没药烯。本发明的工程菌株能够利用含葡萄糖的培养基高效合成α‑红没药烯，产量高达208.23mg/L。通过甲羟戊酸合成途径的线粒体定位并利用含葡萄糖的培养基合成甲羟戊酸及下游萜类化合物，使得解脂耶氏酵母合成甲羟戊酸及下游萜类化合物的产率大幅提高。

摘要： 本发明涉及一种诱导细胞线粒体途径凋亡中筛选声敏剂的方法，包括步骤为：（1）对细胞装载具有声敏性的药物或者声敏性的药物的前体，待声敏剂被细胞吸收或者转化后，给予超声辐照；（2）检测声敏剂与TSPO的结合能力，筛选诱导细胞线粒体途径凋亡的声敏剂。本发明提供了一个筛选声敏剂的靶点，用来筛选可以诱导细胞线粒体途径凋亡的声敏剂，并且为声敏剂药物的筛选提供了一种有效的方法，有利于声敏剂药物的研究和开发，有助于推动声动力治疗的理论研究和临床应用。