一种提高核酸内切酶V切割位置特异性的方法

摘要

本发明是一种提高核酸内切酶V切割位置特异性的方法，涉及一种高通量DNA序列分析方法，特别是指一种快速低成本高通量DNA测序方法。在DNA探针中引入含有核酸内切酶V的识别位点脱氧次黄核苷dI和DNA链中一个或多个磷酸二酯键上的氧被硫代修饰的位点的单链寡核苷酸DNA片段，并且核酸内切酶V的识别位点和硫代修饰位点的相隔距离为二个或二个以上的碱基，该方法可以用于分析未知DNA即待分析的模板DNA的序列信息。由于重新杂交后的高通量引物是通过非常成熟的固相DNA方法合成并纯化得到，因此该方法没有错误延伸的累积效应，能够维持DNA模板和测序引物的量，序列的测定正确可靠，不存在测序长度的限制。