一种在大肠杆菌-链霉菌-假单胞菌之间穿梭表达的BAC载体及其构建方法

摘要

本发明涉及在大肠杆菌-链霉菌-假单胞菌之间穿梭表达的BAC载体及其构建方法。所说的BAC载体，其含有pUC18的复制子，氨苄青霉素抗性基因，接合转移片段oriT，attP位点，整合酶基因int，Am抗性基因，假单胞菌的PP_0423′基因的5′端，假单胞菌的crp基因，BAC载体的redF基因、复制区OriS、repA基因、sopA基因、sopB基因、sopC基因、cos位点和loxP位点。本发明是从pECBAC1出发，将异源表达的必需原件加以有效综合和优化，并运用基因克隆和重组工程等手段，成功构建了穿梭表达BAC载体，为异源表达生物合成基因蔟以及高通量筛选方面提供了方便。