大肠杆菌-链霉菌穿梭型BAC载体及其构建方法

摘要

本发明涉及一种大肠杆菌-链霉菌穿梭型BAC载体及其构建方法，该BAC载体含有多克隆位点MCS，Am抗性基因，整合酶基因int，整合位点attp，接合转移片段oriT，BAC载体的复制区oriS、repA基因、sopA基因、sopB基因、sopC序列、cos位点和loxP位点。本发明从pBeloBAC11出发，用Red同源重组技术将其上的氯霉素抗性基因替换为用于接合转移（oriT）、定点整合（attp-int）和抗性筛选（Am）的oriT-attp-int-Am的DNA片段（称之为替换盒），得到载体pBTIBAC1，为实现大片段基因簇在链霉菌中的异源表达奠定了基础。