表达小干扰RNA的VA1缺失的腺病毒载体的构建方法

摘要

一种表达小干扰RNA的VA1缺失腺病毒载体，重组腺病毒载体中VA1部分基因缺失，不能产生功能性VA1基因，插入了siRNA表达元件及报告基因。其构建方法为：构建VA1缺失的穿梭载体，用VA1缺失的穿梭载体与腺病毒载体骨架按摩尔比3∶1在E.coli BJ5183中同源重组获得VA1基因突变腺病毒载体骨架，构建表达siRNA的腺病毒E1区shuttle载体，构建表达VA1慢病毒载体并感染HEK293细胞以及通过潮霉素抗性筛选获得稳定表达VA1基因的重组HEK 293细胞系，构建表达小干扰RNA的VA1缺失腺病毒载体。表达小干扰RNA的VA1缺失的腺病毒载体在制备治疗肿瘤药物中的用途。