真空渗透辅助大豆未成熟子叶再生体系的遗传转化方法

摘要

本发明公开了一种真空渗透辅助大豆未成熟子叶再生体系的高效遗传转化方法，涉及植物基因工程技术领域。该方法包括如下步骤：(a)大豆未成熟子叶体细胞胚的诱导及增殖；(b)真空渗透辅助导入外源DNA；(c)含有外源DNA的体细胞胚再生成植株。采用了真空渗透辅助农杆菌介导的方法，在一定的真空条件下、一定时间处理后，能够在大豆体细胞胚上制造许多微小伤口，充分提高了农杆菌入侵机会，明显提高了农杆菌的感染效率，与普通农杆菌介导法相比，显著提高了大豆的转化率。采用大豆未成熟子叶作为外植体进行遗传转化，避免了采用子叶节作为外植体进行转化时容易产生嵌合体的问题。