基于CRISPR-Cas自催化放大网络的核酸检测方法及其应用

摘要

本申请提供了一种基于CRISPR‑Cas自催化放大网络的核酸检测方法，包括：提供待测样品，待测样品中含有靶标基因组序列；配制包括Cas蛋白、靶标向导RNA、荧光检测探针、辅助探针和缓冲液反应体系；荧光检测探针包括辅助探针向导RNA和杂交在辅助探针向导RNA上的修饰有可检测的标记物的至少一条寡核苷酸链探针；将待测样品加至反应体系中，经恒温定时反应，荧光检测探针上的至少一条寡核苷酸链探针被Cas蛋白反式切割，释放的辅助探针向导RNA引导Cas蛋白特异性结合辅助探针，形成正反馈回路系统，寡核苷酸链探针被切割后产生可检测信号，检测和获得检测结果。该核酸检测方法灵敏度高、特异性强。本申请还提供了其应用。