基于纳米金与核酸内切酶放大技术检测DNA的压电方法研究

摘要

本实验中将一端巯基修饰的具有发夹结构的DNA 探针用于完全互补以及单 碱基错配基因序列的区分检测。当发夹结构的固定探针与待测体系作用后，进行 酶切反应及金标探针放大。其特点在于结合使用限制性核酸内切酶ECoR I 及纳 米金标记的检测探针，能够很好的降低背景值并有效增强信号。实验中所设计的 发夹状结构固定探针，环状部分的互补序列与待测目标序列一致，发夹分子的茎 部有8 个碱基对互补并可以被ECoR I 特异性识别切割。在结合目标链打开以后 可以进一步和检测探针杂交（二者互补）。通过这一巧妙设计，实现了对目标DNA 用压电方法的检测，而且对错配的目标序列能够有效的区分，顺利实现最初的设 计思路。对一系列不同浓度的目标DNA 进行测试并得到其浓度校正曲线，结果表 明压电石英晶振频率变化与目标DNA 浓度在2-300pM 之间具有较好的相关性，该 方法检测限为2pM。实验结果表明，此方法是一种简单实用、价格低廉、灵敏度 高的适用于DNA 分析检测的技术。