一种利用超声波直接转化苹果属植物获得转基因苗木的方法

摘要

本发明“一种利用超声波直接转化苹果属植物获得转基因苗木的方法”属于生物工程育种领域。超声波直接转化法是将苹果属八棱海棠叶片切成小块在含有5%DMSO和20μg·ml^-1质粒DNA的超声波缓冲液中用功率为80w的超声波处理后，放在再生培养基上培养进行抗性筛选，在超声波最佳处理条件下转化486个八棱海棠叶片，共得到237个抗性愈伤组织和9株抗性苗，转化率为1.85%，大大高于普通农杆菌介导法0.1～0.8%的转化效率。GUS染色、PCR及Southernblotting检测结果显示，有8个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。