马尾松胚性愈伤增殖与维持培养的方法

摘要

本发明公开了一种马尾松胚性愈伤增殖与维持培养的方法，将经过常规体胚诱导3～4周获得的呈抽丝状胚性细胞团与雌配子体分离得到的胚性愈伤组织置于装有培养基Ⅰ的培养皿中，4～6周去除胚性愈伤组织中的死细胞与多余组织，转入离心管中并加入培养基Ⅱ混合摇匀，然后将摇匀后获得的胚性培养物置于装有培养基Ⅲ的培养皿中，6～8周后取适量大小的胚性愈伤直接转入培养基Ⅳ中进行正常继代，继代周期10～14 d，最后获得生长迅速、活力旺盛并可进行长期继代培养的马尾松胚性细胞系。本发明的胚性愈伤在长期继代培养中无明显褐化与水渍化现象，胚性愈伤生长快，增殖效果稳定高，增殖系数达25以上，具有较好的经济效益和社会效益。