一种栉孔扇贝消化盲囊亚细胞组分分离方法

摘要

一种栉孔扇贝消化盲囊亚细胞组分分离方法，其步骤如下：1）制备匀浆缓冲液、蔗糖缓冲液和储备缓冲液；（2）对消化盲囊组织进行匀浆；3）匀浆破碎率检验；4）离心分离亚细胞组分；5）Hoechst 33258荧光染色检验细胞核纯度和活性，以及细胞膜、线粒体、微粒体、细胞质受到细胞核污染的程度；6）酶活鉴定亚细胞组分。本发明针对栉孔扇贝独特的生理条件和组织细胞特征，制备适宜后续操作的匀浆液，利用超速离心的方法，从匀浆液中分离得到纯度较高、污染程度低的5种亚细胞组分，包括细胞核、细胞膜、线粒体、微粒体、细胞质。且首次利用Hoechst染色法检验贝类细胞匀浆液破碎率和细胞核存在形态、活性，该方法简便、灵敏，为贝类组织亚细胞组分分离技术提供了技术依据。