一种重组质粒及其构建方法

摘要

本发明涉及一种重组质粒及其构建方法，所述重组质粒的构建方法包括：(1)PCR法扩增Kan基因及其启动子，并将PCR产物电泳分析和回收纯化；(2)PCR法克隆pGFPuv质粒，并回PCR产物，但质粒中Amp和其启动子不进行克隆；(3)培养上述得到的基因与载体并转化挑取单克隆菌株进行鉴定测序，结果得到绿色荧光蛋白表达载体pKGFPuv；(4)将pKGFPuv转化到DH5α中，即得到重组质粒。本发明重组构建的质粒带卡纳抗性且能够稳定表达GFPuv蛋白，填补了如今带有GFPuv的质粒没有卡纳抗性的空缺，为很多生物学研究提供了很大的便利，同时也对微生物在生物体内的实时观测提供了很大的帮助。