一种具有免疫保护作用的迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FlgJ

摘要

本发明公开了一种具有免疫保护作用的迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FlgJ在亚单位疫苗中的应用，利用原核表达方法制备得到该重组蛋白，具体包括：以迟缓爱德华菌ET‑CL基因组序列为模板，PCR扩增flgJ基因；构建pMD18‑T‑flgJ载体，对flgJ基因进行序列测定；构建重组表达载体pET‑32a‑flgJ；将重组表达载体转化DH5α感受态细胞，挑取单克隆进行PCR和双酶切验证，获得阳性克隆，提取质粒，测序；转化BL21工程菌，进行重组蛋白的原核表达；利用SDS‑PAGE分析重组蛋白表达情况；对重组蛋白进行Western blot验证。本发明通过原核表达系统对迟缓爱德华菌鞭毛蛋白FlgJ进行表达纯化，通过动物实验证明该重组蛋白具有免疫保护力，表明该重组蛋白能够用于研制迟缓爱德华菌亚单位疫苗。