一种热稳定性苹果酸脱氢酶基因的构建方法、编码蛋白及其应用

摘要

本发明公开了一种热稳定性苹果酸脱氢酶基因的构建方法、编码蛋白及其应用，本发明苹果酸脱氢酶基因以原生表达质粒基因序列为模板，采用设计的突变引物，进行快速点突变PCR扩增突变质粒，转化菌抗性筛选，构建能够表达苹果酸脱氢酶的基因序列，并将构建的突变的苹果酸脱氢酶基因转到大肠杆菌DE3菌株中进行表达，本发明表达的苹果酸脱氢酶，具有比样本野生型表达的苹果酸脱氢酶热稳定性高且活性高的特性，为D‑苹果酸的生产提供更高效的拆分和纯化用酶。