RT-qPCR检测猕猴肝脏嘌呤核苷磷酸酶PNP基因转录水平的引物、试剂盒及方法

摘要

本发明涉及RT‑qPCR检测猕猴肝脏嘌呤核苷磷酸酶PNP基因转录水平的引物、试剂盒及方法，属于分子生物技术领域。本发明方法以猕猴新鲜肝脏组织提取的总RNA逆转录合成得到的cDNA为模板，利用PCR引物组合进行实时荧光定量PCR扩增，获得PNP基因片段及内参基因GAPDH片段的Ct值及溶解峰、扩增效率，通过常规处理得均一化后的PNP基因倍数表达的ΔΔC(t)值，从而获得PNP基因转录水平相对表达值。本发明为研究猕猴PNP功能以及相关药物对其影响提供了有效途径，同时，本发明适用于实时定量PCR检测，其操作简单，可重复性高，检测成本低、灵敏性高、特异性强，易于推广应用。