一种耐热耐碱木聚糖酶酵母工程菌及其耐热木聚糖酶的生产方法

摘要

本发明提出一种提高木聚糖酶热稳定性的方法和一种产耐热耐碱重组木聚糖酶的酵母基因工程菌HB148n3。是通过将来自短小芽孢杆菌的木聚糖酶XYNHB第214位的天冬酰胺突变成丙氨酸，通过在毕赤酵母表达的糖基化修饰，而使重组木聚糖酶热稳定性提高，具体表现为在60℃的半衰期由12分钟提高到65分钟，其它性质不变。将该突变的基因插入到毕赤酵母整合表达载体中，导入到毕赤酵母菌中，从中筛选出一种高效表达耐热耐碱小分子量木聚糖酶的酵母基因工程菌，用该酵母基因工程菌发酵的重组木聚糖酶，发酵粗酶酶活性可达650U/ml。