一种类胡萝卜素代谢基因功能鉴定方法

摘要

本发明公开了一种类胡萝卜素代谢基因功能鉴定方法，包括以下步骤：S1：克隆筛选标记元件：从pGBK‑T7载体中克隆了由Amp^r启动子驱动的卡那霉素抗性基因Kan^r，以此元件(pAmp^r::Kan^r)作为后续的筛选标记；S2：克隆启动子：克隆了蓝细菌集胞藻Synechocystis sp.PCC6803中的RuBisCO大亚基基因(rbcL)的启动子序列，该启动子用于驱动待检测的酶基因；S3：酶基因的克隆：来自不同生物的待鉴定类胡萝卜素代谢相关酶基因X克隆于rbcL启动子的下游(rbcL::X)，由该启动子驱动；S4:表达盒的构建：一个完整的基因表达盒包括依次排列的一个pAmp^r::Kan^r筛选标记元件以及一个用于表达酶蛋白的rbcL::X元件。与传统鉴定方法相比，本方法具有更加简便、直接的优势，可以明确而有针对性地对基因功能进行鉴定。