突变的菜豆根瘤菌亲和素蛋白及其应用

摘要

本发明公开了一种突变的菜豆根瘤菌亲和素蛋白(rhizavidin)及其应用。根据野生型rhizavidin蛋白与生物素结合的分子机理，设计并筛选了能够与生物素可逆结合的突变rhizavidin蛋白，包括Tyr41Phe/Asn43Gln双突变rhizavidin以及Tyr41Phe/Asn43Gln/Ser69Cys三突变rhizavidin。所述突变rhizavidin蛋白可以与生物素或生物素化的生物分子可逆结合，偶联有这种突变rhizavidin蛋白的亲和层析树脂可捕获生物素化的生物分子，而被捕获的生物素化的生物分子可在温和的生理条件下用游离生物素竞争洗脱下来，从而达到纯化目的。