一种基于短链核酸探针和双链特异性核酸内切酶的高特异性microRNA荧光检测方法

摘要

本发明公开了一种基于短链核酸探针和双链特异性核酸内切酶的高特异性microRNA荧光检测方法。本发明通过使用短链DNA探针，结合DSN酶，在加速探针/miRNA杂交速率和杂交‑酶切循环速率的同时，提高了探针对杂交反应碱基错配的敏感性，实现人体温度下的miRNA高灵敏度、高特异性恒温检测；可敏感区分单碱基错配的同源相似miRNAs。本方法可在37℃下获得高效扩增反应，相比于其他基于DSN酶的扩增反应(温度需为55～60℃)，更适合用于细胞等原位或活体检测。该扩增反应为恒温反应，无需精确的控温或温度循环装置，操作简单，成本低，更适合市场推广。