确定miR-27a基因的核心启动子及其内转录因子Myod结合位点的方法

摘要

本发明提供确定miR‑27a基因的核心启动子的方法，从小鼠血液基因组DNA中扩增8条miR‑27a启动子缺失片段，构建重组双荧光素酶表达载体pGL3‑D1到pGL3‑D8，转入CHO细胞后检测8个缺失片段的荧光素酶活性，获得核心启动子区；该方法鉴定了miR‑27a的核心区，为基因工程和分子育种提供了新的启动子资源；本发明还提供确定miR‑27a基因核心启动子内转录因子Myod结合位点的方法，通过超表达转录因子Myod和定点突变核心启动子区内的转录因子结合位点，构建突变型荧光表达载体，检测荧光素酶活性，确定转录因子结合位点；为miR‑27a的表达调控运用于家畜高繁殖力分子调控机制的研究提供依据。