一种通过CRISPR/Cas9系统快速筛选重组鸡痘病毒的方法及其应用

摘要

本发明涉及生物技术领域，具体是指一种通过CRISPR/Cas9系统快速筛选重组鸡痘病毒的方法及其应用。所述方法步骤包括：设计靶基因的sgRNA双链寡核苷酸序列；将所述序列与线性化的质粒载体连接，得到sgRNA表达载体；将sgRNA表达载体、表达外源基因的重组鸡痘病毒质粒、鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF)；纯化并验证纯化效果。本发明通过CRISPR/Cas9方法将重组鸡痘病毒筛选代次降低至3‑4代，大大提高了疫苗生产的效率，操作简便，降低了生产成本。