一种中枢神经系统特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠的制备方法

摘要

本发明涉及的制备方法包括利用从129sv小鼠基因组文库克隆得到的1.8kb的神经胶质细胞酸性蛋白基因(GFAP)的5’端调控序列，构建了含有两个β球蛋白绝缘子、GFAP5’端调控区、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pGFAP-Cre-hGH。以显微注射的方法将7.6kb的转基因片段βglobininsulator-pGFAP-Cre-hGH引入191枚小鼠受精卵，其中176枚分别移植至8只假孕母鼠的输卵管中使其发育，共获得子代小鼠25只，经PCR和Southern杂交鉴定其中7只小鼠基因组上整合有Cre基因，整合率为28%。用整合有Cre基因的转基因小鼠与基因组上整合有LoxP位点和LacZ表达框的ROSA26鼠杂交，以检测Cre酶介导的重组与其活性和组织特异性。LacZ染色结果表明：GFAP-Cre转基因小鼠只在中枢神经系统中表达Cre重组酶并能在体内成功介导LoxP位点间的重组(见附图)。