Ⅱ型肺泡上皮细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立和鉴定

摘要

Ⅱ型肺泡上皮(AT2)细胞能够合成和分泌肺表面活性物质,参与调控肺的先天性免疫应答,还可以通过分化成为I型肺泡上皮来维持损伤后的成体肺上皮稳态.本文利用显微注射和受精卵移植技术研制了表面活性蛋白(SP-A)启动子指导Cre重组酶基因在Ⅱ型肺泡上皮细胞中表达的转基因小鼠。通过PCR对移植后出生小鼠的基因组DNA进行鉴定，确认Cre重组酶基因发生整合的小鼠，将其与ROSA26报告小鼠交配，利用LacZ染色在子代小鼠中对Cre重组酶表达的组织分布进行鉴定。结果显示，SP-A-Cre重组酶仅在肺组织中特异性表达。通过免疫组化和流式细胞分析，确认该Cre重组酶特异性表达于II型肺泡上皮细胞，而非I型肺泡上皮细胞。